利用內切酶突變體改裝醣蛋白及其使用方法
更新時間: 2024-03-06 15:11:26
利用內切酶突變體改裝醣蛋白及其使用方法
本院覽號
28A-1050824
公告日期
2020-05-05
智財權狀態
US 10000747 B2、TW I706035、US 10407673 B2、KR 102166120、AU 2017315677、JP 6965350、IN 479949
摘要
從細菌Streptococcus Pyogenes挑選內切酶EndoS2突變體可用在合成攜帶各式不同醣體之醣胜肽及醣蛋白。挑選之突變位置位於野生型EndoS2之胺基酸序列133-143, 序列177-182, 序列184-189, 序列221-231, 或序列227-237。這些突變體可降低原來野生型之水解活性並提升轉醣活性。此外,利用EndoS2突變體製備擁有目標醣體之醣蛋白的方法,將活化的多醣與醣蛋白受體混合,藉由EndoS2突變體的活性,便能使醣蛋白上醣體一致化,進而減少生物活性的差異,甚至可以增強經過醣改造抗體之後續免疫功能。
技術優勢
- 轉醣活性比起EndoS更有效率。
- 酵素具低水解活性及高轉醣活性可對醣蛋白進行醣體改造,並獲得有均相化醣體之醣蛋白。
- EndoS2突變體針對不同種類的N醣體(high mannose, hybrid, and complex type)均具有轉醣活性,可轉上醣胜肽或醣蛋白,在醣蛋白改造中唯一大利器。
應用範圍
- 將目標醣體轉醣至醣蛋白可應用在生產均相化抗體上,使抗體後續免疫功能增強,例如與FcγRIIIA受體有更高的結合能力,也有更高的抗體依賴的細胞介導的細胞毒性作用,藉此來清除目標細胞(例如;癌症細胞)。甚至可使抗體在體內循環半衰期延長,或減少發炎反應等等。
- 達成醣蛋白上醣體的一致性。
創作人
吳宗益、翁啟惠、鄭婷
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