用於超高解析度成像顯微技術之閃爍螢光團
更新時間: 2021-02-08 13:44:03
用於超高解析度成像顯微技術之閃爍螢光團
本院覽號
03A-1080325
公告日期
2020-01-03
智財權狀態
專利申請中
摘要
dSTORM/PALM能獲取超越繞射極限解析度的光學影像,但是用於該技術的螢光團必須要能透過化學或是照光反應達到"亮"和"暗"兩種狀態轉換,而這種"亮"和"暗"轉換在dSTORM/PALM影像中就會呈現隨機閃爍的光點,最後透過數學模型重建閃爍點的位置,就能得到超高解析度影像。然而一般情況要使螢光團閃爍,必須加入極高濃度的還原劑才能達到閃爍現象,但是會對細胞造成毒性,因此無法做活細胞實驗,也較難控制閃爍動態。
能光致變色的腙類衍生物可透過聯氨修飾的胜肽/蛋白質和有醛基的螢光團縮合而成。其中的E-enol結構在照光後會發生"激發態內分子質子轉移",並形成E-keto產物,而該產物的螢光也就是顯微鏡的"閃爍"。能光致變色腙類衍生物不需要添加物就會閃爍,因此可做活細胞影像,並且也可利用控制入射光強度控制閃爍動態。
技術優勢
- 小分子量但有激發態內分子質子轉換造成的明顯光致變色色差。
- 在dSTORM/PALM中有可調控的閃爍動態。
- 不需要額外有毒添加物,即可應用於活細胞超高解析度顯微鏡顯像。
- 容易合成並修飾於胜肽/蛋白或抗體。
- 在水溶液中有不錯的光穩定性。
應用範圍
- 用於一般市售螢光團,修飾生物相關胜肽/蛋白/抗體並用於超高解析顯微鏡。
- 用於一般市售螢光團,並以超高解析顯微鏡觀察聚合物微觀結構。
- 用於分子機械並當成奈米材料結構。
- 用於光藥理學中蛋白受器配體的修飾。
圖1.閃爍螢光團可用於染色聚合分子並以dSTORM/PALM觀察。
圖2.閃爍螢光團可修飾在抗體上,並透過免疫染色在dSTORM/PALM中顯現細胞內聚積分子微觀結構。
創作人
黃人則
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