具高產量狒狒內源性反轉錄偽慢病毒之改造HEK293T細胞株
發佈時間: 2024-01-29 00:00:00
具高產量狒狒內源性反轉錄偽慢病毒之改造HEK293T細胞株
本院覽號
11A-1120608
智財權狀態
美國臨時案申請中
摘要
人類初代自然殺手(NK cells)細胞的研究和應用都受限於外來基因的轉導能力,已知先前研究透過改造狒狒內原性反轉錄病毒(BaEV)的醣蛋白作為偽慢病毒(pseudotype lentivirus)的外套膜能高效率的感染NK細胞。然而,由於這個醣蛋白的特性,HEK293T細胞在生產BaEV偽慢病毒時會發生胞合(syncytia)現象然後死亡,因此這種偽慢病毒的產量非常低。在此,我們透過CRISPR-Cas9技術對病毒生產之HEK293T細胞進行基因編輯後,成功避免生產BaEV偽慢病毒時的胞合現象,進而促進BaEV病毒產量。此外,我們證實此基因敲落HEK293T細胞並無任何生長及代謝缺陷。最後,我們證明此生產平台能夠高效率生產攜帶不同大小轉基因(如:抗原嵌合受體CAR、 dCas9)的BaEV偽慢病毒。
技術優勢
- 相較未編輯之HEK293T cell提升5-10倍BaEV偽慢病毒產量
- 易於操作病毒純化
應用範圍
- 抗體嵌合受體自然殺手細胞治療(CAR-NK)之慢病毒制備
- 人類自然殺手細胞、B細胞、造血幹細胞之基礎研究及其應用
創作人
凌嘉鴻

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