本院覽號:13A-841024
創作人:余淑美、劉麗飛
智財權:US 5,460,952、TW 321685、JP 3,400,050
摘要:
本發明發現在水稻懸浮培養細胞的培養基中施以缺糖處理,則細胞中的某些α- 澱粉水解酵素基因會大量表現,α- 澱粉水解酵素也大量製造即分泌到細胞外的培養基中。本案自水稻的基因群 DNA 存庫中篩選出售的缺糖誘導而大量表現的α- 澱粉水解酵素基因的啟動子及訊號胜 太鏈的 DNA 序列,進而利用α- 澱粉水解酵素基因的啟動子及訊號胜 太鏈的 DNA 序列與葡萄糖醛酸甘酵素(GUS)報導基因 (reporter gene) 及抗潮黴素 (Hygromycin) 基因共同構築成一種 GUS 表現載體,並將之轉殖到水稻懸浮培養細胞中,以瞭解在α- 澱粉水解酵素基因的啟動子控制下,GUS 表現載體在細胞內的表現情形。由此可利用α- 澱粉水解酵素基因的啟動子及訊號胜 太鏈引導蛋白質分泌的特性,來從事基因調控與蛋白質表現與分泌。
可能的應用範圍:
植物分子農場
此項發明的優點:
本發明利用植物細胞來使基因工程技術蛋白質具有利用細菌、酵母菌等傳統方法所缺乏之優點,例如:植物細胞是高等真核細胞生物,其所生成之蛋白質進行過許多複雜的轉譯後修飾以使該蛋白質具有活性,而細菌及酵母菌則是缺乏或是僅具部份轉譯後修飾系統。
桿狀病毒(Baculovirus)是昆蟲細胞的病毒,利用其來製備重組型蛋白質通常具極佳活性故此系統是目前普遍採用之基因表現系統,惟該病毒必須感染培養的昆蟲細胞才能進行基因重組型蛋白質之製備,而培養昆蟲細胞的培養基需含有血清,成本極高。
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